Ćwiczenie 1
1. Organizacja zakładu, zasady BHP
- Pobieranie i przechowywanie materiału do badań immunologicznych
- Płyny hodowlane, podłoża stosowane w immunodiagnostyce
- Metody badań immunologicznych
2. Metody izolacji komórek układu odpornościowego
- Metody izolacji komórek z krwi obwodowej
- Leukocytoza (komora Bürkera)
- Leukogram
Ćwiczenie 2
1. Komórki odpowiedzi nieswoistej
- Komórki układu fagocytarnego: granulocyty, monocyty, makrofagi
2. Czynności komórek odporności nieswoistej monocytów, makrofagów, granulocytów – migracja i chemotaksja
- Pojęcia: migracja, chemotaksja
- Czynniki aktywujące proces chemotaksji
- Czynniki hamujące chemotaksję
Ćwiczenie praktyczne
1. Test chemotaksji neutrofilów metodą filtrową i płytkową
Ćwiczenie 3
1. Adhezja
- adhezja leukocytów
- etapy adhezji
- cząsteczki adhezyjne uczestniczące w procesie adhezji - rola, funkcje.
Ćwiczenie praktyczne
1. Test adherencji metodą McGregora.
Ćwiczenie 4
1. Fagocytoza: immunologiczna, nieimmunologiczna
- Pojęcia: fagocytoza, opsoniny
- Rodzaje receptorów uczestniczących w fagocytozie nieimmunologicznej
- Opsoniny: nieswoiste i swoiste
Ćwiczenie praktyczne
1. Test fagocytozy neutrofilów z lateksem
Ćwiczenie 5
1. Mechanizm wewnątrzkomórkowego zabijania
- Rola reaktywnych form tlenu w nieswoistych mechanizmach zabijania
- Czynniki uczestniczące w mechanizmie zabijania niezależnego od tlenu
- Enzymy odpowiedzialne za powstawanie reaktywnych form tlenu
Ćwiczenie praktyczne
1. Testy czynnościowe NBT: spontaniczny i stymulowany metodą Parka
2. Ocena ekspresji katepsyny G w neutrofilach
Ćwiczenie 6
1. Mechanizm wewnątrzkomórkowego zabijania niezależny od tlenu
- czynniki uczestniczące w mechanizmie zabijania niezależnego od tlenu
- charakterystyka czynników uczestniczących w mechanizmie zabijania niezależnym od tlenu; lokalizacja w komórce, rola, funkcje
Ćwiczenie praktyczne
1. Ocena ekspresji katepsyny G w neutrofilach
Ćwiczenie 7
1. Układ dopełniacza
- Aktywatory i inhibitory drogi klasycznej i alternatywnej
- Kaskada drogi alternatywnej układu dopełniacza
- Kaskada drogi klasycznej układu dopełniacza
- Mechanizmy regulujące układ dopełniacza
- Niedobory białek dopełniacza
- Metody oznaczania układu dopełniacza
Ćwiczenie praktyczne
1. Oznaczanie aktywności układu dopełniacza met. hemolityczną CH50 w surowicy krwi
Ćwiczenie 8
1. Odporność swoista
- Odpowiedź swoista komórkowa i humoralna
- Odpowiedź nabyta czynna i bierna, sztuczna i naturalna
- Charakterystyka komórek odpowiedzi swoistej
2. Receptory powierzchniowe limfocytów (FcR, CR, lektynowe, dla erytrocytów barana)
- Markery powierzchniowe limfocytów T i B
3. Metody oceny subpopulacji limfocytów T i B
- Subpopulacje limfocytów
- Typowanie limfocytów (cytometria przepływowa)
Ćwiczenie praktyczne
1. Typowanie limfocytów T i B metodą cytometrii.
Ćwiczenie 9
1. Charakterystyka funkcji limfocytów
- Limfocyty helperowe (Th)
- Limfocyty cytotoksyczne (Tc)
- Limfocyty regulatorowe (Treg)
- Limfocyty B
Ćwiczenie praktyczne
1. Test transformacji blastycznej indukowany PHA
Ćwiczenie 10
1. Mediatory reakcji immunologicznych (cytokiny)
2. Cytokiny - podstawowe mediatory reakcji międzykomórkowych
- Właściwości cytokin
- Interleukiny, chemokiny, interferony, czynnik martwicy nowotworu, czynniki wzrostu
- Charakterystyka cytokin pro- i anty- zapalnych
- Metody badania cytokin
Ćwiczenie praktyczne
1. Test hamowania migracji leukocytów indukowany PHA – index migracji
Ćwiczenie 11
1. Ilościowa ocena przeciwciał
a. Charakterystyka immunoglobulin surowicy krwi
- Synteza i powstawanie przeciwciał
- Budowa immunoglobulin
- Podział immunoglobulin na klasy i podklasy
- Przeciwciała monoklonalne
b. Surowice odpornościowe
c. Dyfuzja i immunodyfuzja
d. Oznaczacie poziomu Ig w surowicy krwi wg techniki Mancini
e. inne metody oznaczania przeciwciał oparte na immunodyfuzji i ich zastosowanie w diagnostyce
- Metoda Oudina
- Metoda Ouchterlony
f. Nefelometria
g. Turbidymetria
Ćwiczenie praktyczne
1. Badanie poziomu immunoglobulin wg techniki Mancini
Ćwiczenie 12
1. Ocena stężeń i składu krążących kompleksów immunologicznych (KKI).
- Metody oceny stężeń KKI.
Część praktyczna:
1. Oznaczanie stężeń KKI metodą wytrąceniową.
2. Oznaczanie stężeń KKI metodą immunoelektroforezy.
Elektroforeza pozioma
Ćwiczenie 13
- Sprawdzian pisemny
- Egzamin praktyczny